�(xì)胞培�(yǎng)是研�(fā)及生�(chǎn)CGT藥品的關(guān)鍵環(huán)節(jié),對CGT制品的質(zhì)�、穩(wěn)定性以及安全性等�(chǎn)生很大的影響,上期分享了動物來源原輔料在CGT研發(fā)與生�(chǎn)中存在的�(fēng)�(xiǎn)和問�(戳這里回顧�,也分享了禾元生物的植物源原輔料在CGT中的�(yōu)�,本期就來分享禾元生物的�(dāng)家產(chǎn)�——植物源重組人血清白蛋白OsrHSA在CGT�(xì)胞培�(yǎng)中的�(yīng)��
一、什么是OsrHSA?
人血清白蛋白(Human Serum Albumin,HSA)作為人血漿中含量最豐富的蛋�,是激�、脂類等物質(zhì)的轉(zhuǎn)�(yùn)載體,其主要生理功能是調(diào)節(jié)血漿pH值和維持血漿滲透壓�
OsrHSA是禾元生物利用自己的專利技�(shù)平臺—— 水稻胚乳�(xì)胞生物反�(yīng)器高效重組蛋白質(zhì)表達(dá)平臺(OryzHiExp)和重組蛋白純化技�(shù)平臺(OryzPur)研發(fā)和生�(chǎn)的重組人血清白蛋白,不含有動物源成分,也無任何血液源的病毒感染風(fēng)�(xiǎn)。與血漿來源白蛋白(pHSA)和牛血清白蛋白(BSA)相比,OsrHSA具有更高的純�,更好的批次穩(wěn)定�。OsrHSA在水稻胚乳中表達(dá)并儲存在水稻蛋白體中,能最大限度地保持蛋白�(zhì)的穩(wěn)定性和生物活性�
1. OsrHSA和血漿來源白蛋白pHSA理化性質(zhì)比較
2. OsrHSA 與pHSA的結(jié)�(gòu)一�
�1.OsrHSA的整體結(jié)�(gòu)
圓二色譜測定出OsrHSA 的分子結(jié)�(gòu)主要�α螺旋,如圖 1A所�,和pHSA一�,OsrHSA總體�(jié)�(gòu)呈現(xiàn)出一�(gè)心形形狀,由三�(gè)�(jié)�(gòu)域組�。圖1B�,OsrHSA和pHSA的兩�(gè)分子的結(jié)�(gòu)完全一�,完全重疊,說明 OsrHSA具有和pHSA相同的空間結(jié)�(gòu)�
3. OsrHSA 具有良好的批間一致�
�2 pHSA與不同批次OsrHSA的HPLC�(jié)�(�(lán)�-pHSA,其他顏�-OsrHSA)
用SEC-HPLC檢測不同批次的OsrHSA,結(jié)果顯示圖譜高度重合,且純度均大于99%,相對�(biāo)�(zhǔn)偏差小于5%,表明批間一致性極�。在2-8℃儲�48�(gè)月后,pHSA相對于OsrHSA,聚集體含量明顯更�,表明OsrHSA長期�(wěn)定性高于pHSA,儲藏穩(wěn)定性質(zhì)量相較于pHSA更好�
4. OsrHSA臨床前安全性研�
�、OsrHSA在細(xì)胞培�(yǎng)中的�(yīng)�
多項(xiàng)�(shí)�(yàn)�(shù)�(jù)反饋OsrHSA能有效促�(jìn)干細(xì)胞增�,維持干�(xì)胞形�(tài)及多功能性:
�3.在hMSCs�,OsrHSA和BSA以及血清培�(yǎng)的增殖情況對�
在hMSC培養(yǎng)�,不同濃度的OsrHSA均能有效的促�(jìn)�(xì)胞增�,同濃度下,OsrHSA對MSC的增殖效果顯著優(yōu)于BSA,OsrHSA對hMSC的增殖效果與傳統(tǒng)血清培�(yǎng)基相比差不多,說明OsrHSA能取代動物血清和BSA,為hMSC�(xì)胞培�(yǎng)提供更安全的選擇�
�4 OsrHSA和日本市售rHSA在iPSC中的分化表現(xiàn)(ALP染色和標(biāo)記物熒光顯色)
與日本市售rHSA相比�0srHSA在iPS�(xì)胞培�(yǎng)中能有效的促�(jìn)�(xì)胞增�,維持�(xì)胞形�(tài),并且能更有效的維持iPS的多功能��
�、OsrHSA在細(xì)胞培�(yǎng)中的�(yōu)�(diǎn)
血清白蛋白在CGT�(xì)胞培�(yǎng)中發(fā)揮多種生理功能:
1. 維持培養(yǎng)液體系的滲透壓和pH�;
2. 金屬離子螯合�、脂�(zhì)、氨基酸以及生長因子的轉(zhuǎn)�(yùn)載體;
3. 自由基清楚除�(抗氧化功�);
4. �(wěn)定劑
上文�(shí)�(yàn)�(shù)�(jù)已經(jīng)證明了禾元生物的植物源重組人血清白蛋白OsrHSA可以促�(jìn)�(xì)胞生長和增殖,維持干�(xì)胞形�(tài)和多功能�,在�(xì)胞培�(yǎng)中發(fā)揮著積極作用。與動物或人血來源的血清白蛋白相比,OsrHSA不存在任何動物源成份,無任何病毒感染�(fēng)�(xiǎn),且禾元生物通過�(guī)模化種植水稻已經(jīng)�(shí)�(xiàn)超級�(chǎn)能擴(kuò)大化。另外今�6月份,禾元生物年�(chǎn)10噸OsrHSA原液生產(chǎn)線正式開始投�(chǎn),這標(biāo)志著禾元生物可以為CGT市場輸送更多更�(wěn)定的植物源原輔料,助力各大企�(yè)提升�(chǎn)品生�(chǎn)工藝,提高產(chǎn)品安全和�(wěn)定性。此外禾元生物的OsrHSA注射液正在展開全球多中心III期臨床中,并且OsrHSA已經(jīng)通過中國CDE藥用輔料備案:F20180000305;并且取得FDA批準(zhǔn)DMF文件,DMF No.�029648(IV�)�
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