以分子生物學(xué)為原理,應(yīng)用遺傳工程和DNA重組技術(shù),利用水稻種子作為生物反應(yīng)器,在種子中特異性表達(dá)各種重組蛋白質(zhì)和小分子多肽。該平臺(tái)可解決在其他表達(dá)體系表達(dá)量低和大規(guī)模生產(chǎn)困難的問(wèn)題,相比其他原核或真核細(xì)胞表達(dá)平臺(tái)更加安全,成本更低。
外源基因密碼子優(yōu)化
載體構(gòu)建
遺傳轉(zhuǎn)化
組織培養(yǎng)
植株再生
水稻特異性表達(dá)與篩選
規(guī)?;N植
選擇具有儲(chǔ)藏功能的水稻胚乳細(xì)胞作為生物反應(yīng)器,采用胚乳細(xì)胞特異性表達(dá)的啟動(dòng)子、人工定點(diǎn)突變?cè)鰪?qiáng)啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄水平、蛋白定向儲(chǔ)存、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)減負(fù)和密碼子優(yōu)化等綜合技術(shù),使重組蛋白特異性地在水稻胚乳細(xì)胞中表達(dá),并定向儲(chǔ)存在蛋白體中,獲得了較高的重組蛋白的表達(dá),使得重組蛋白產(chǎn)量由mg級(jí)別提高到20g級(jí)別。
水稻表達(dá)體系主要雜質(zhì)為四種儲(chǔ)藏蛋白,而且其中主要的三種為非水溶性蛋白,因此重組蛋白的純化工藝簡(jiǎn)單,純化成本低。
蛋白原料的生產(chǎn)由發(fā)酵或細(xì)胞培養(yǎng)變?yōu)樘镩g種植,不受發(fā)酵體積的技術(shù)限制,且生產(chǎn)規(guī)模的擴(kuò)大不需要大量固定資產(chǎn)投入用以擴(kuò)大發(fā)酵罐或細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模以及車(chē)間建設(shè),而且稻谷原料可在常溫存儲(chǔ)2-3 年,在陰涼條件下儲(chǔ)藏5 年,儲(chǔ)存過(guò)程中蛋白質(zhì)不易降解,隨時(shí)可以進(jìn)行規(guī)?;崛『图兓a(chǎn)。
利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的植物源重組蛋白不存在傳播動(dòng)物血源性病原體的潛在風(fēng)險(xiǎn)。
水稻原料生產(chǎn)能耗非常低,二氧化碳和污水排放為0。