水稻胚乳細胞生物反應器高效重組蛋白表達平臺OryzHiExp特點介紹
選擇具有儲藏功能的水稻胚乳細胞作為生物反應器,采用胚乳細胞特異性表達的啟動子、人工定點突變增強啟動子的轉(zhuǎn)錄水平、蛋白定向儲存、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)減負和密碼子優(yōu)化等綜合技術,使重組蛋白特異性地在水稻胚乳細胞中表達,并定向儲存在蛋白體中,獲得了較高的重組蛋白的表達,使得重組蛋白產(chǎn)量由mg級別提高到20g級別。
項目實施階段
階段 | 具體項目 | 實驗周期 |
第一階段 獲取目的基因品系種子 |
基因優(yōu)化合成 | 1個月 |
載體構建 | 1個月 | |
愈傷組織誘導/篩選高表達量植株/表達量檢測 | 4個月 | |
幼苗移栽與培育/獲得10-20株陽性T0代種子 | 6個月 | |
第二階段 獲得可穩(wěn)定遺傳純合子種子 |
T0代種植篩選/獲得陽性T1代種子 | 4個月 |
篩選最少5株以上高表達量的植株品系 | 1個月 | |
T1代高表達純合子種植/篩選純合品系/獲得T2代種子 | 4個月 | |
表達量與蛋白質(zhì)生物活性分析鑒定 | 1個月 | |
第三階段 純化工藝小試 |
設計和開發(fā)符合純度需求的小試純化工藝開發(fā),獲得mg-g級的純化小試工藝樣品 | 6個月 |
可以實現(xiàn)
1、大分子蛋白,分子量可以覆蓋從100-1000個氨基酸大小;
2、小分子多肽:分子量小于100個氨基酸;
3、每kg糙米的目標蛋白表達量在0.1g-10g。
特別適用于:
1、生物制藥,比如疫苗、靶向蛋白/抗體藥、非靶向治療蛋白藥物;
2、工業(yè)生物酶,比如診斷用酶、生物制藥工藝用酶;
3、生命科學研究工具酶等產(chǎn)品。