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新品�(fā)布——水稻重組人�(zhuǎn)鐵蛋白(禾創(chuàng)OsrhTF�
來源:禾元生�| �(fā)布時(shí)間:2022-11-17| �(diǎn)擊量�3122
一、轉(zhuǎn)鐵蛋白簡�

�(zhuǎn)鐵蛋白(Transferrin,TRF、TF)又稱運(yùn)鐵蛋�,是在無脊椎�(dòng)物和脊椎�(dòng)物的生物液體中發(fā)�(xiàn)的糖蛋白,主要由肝臟制�,轉(zhuǎn)鐵蛋白是體內(nèi)最�(guān)鍵的鐵池,它是身體鐵狀�(tài)的重要生化標(biāo)志物。轉(zhuǎn)鐵蛋白由位于同源N-端和C-端的兩�(gè)葉片(Lobe)組成的一種單鏈糖蛋白。人�(zhuǎn)鐵蛋白共�678�(gè)氨基酸殘基,等電�(diǎn)�5.9、分子量�76kD。每分子的轉(zhuǎn)鐵蛋白能攜帶2�(gè)三價(jià)鐵離�(Fe3+)。轉(zhuǎn)鐵蛋白與Fe3+的相互作用取決于pH,pH�7.4�(shí),轉(zhuǎn)鐵蛋白與Fe3+高效�(jié)�,在酸性pH下兩者分�。它一共有兩�(gè)鐵離子結(jié)合位,每�(gè)�(jié)合位可以與一�(gè)鐵離子結(jié)�。在羧基端(carboxyl terminal)的�(jié)合位與鐵離子有很高的親和�,只�(huì)與鐵離子�(jié)�。在氨基端的�(jié)合位則是可以與其他離子結(jié)�,親和力高低如下:鐵>�>�>�>鎳。三�(jià)鐵離子與�(zhuǎn)鐵蛋白的�(jié)合需要一�(gè)陰離子的存在,通常是碳酸氫�。與鐵離子結(jié)合的�(zhuǎn)鐵蛋白稱為飽和轉(zhuǎn)鐵蛋白或全鐵�(zhuǎn)鐵蛋白(Holo-transferrin),未與鐵離子結(jié)合的�(zhuǎn)鐵蛋白稱為脫鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白(Apo-transferrin��

�(zhuǎn)鐵蛋白主要存在于血漿中,血漿中的轉(zhuǎn)鐵蛋白供�(yīng)�(jī)體絕大部分組織的�,而在其不能到�(dá)的部位,由這些組織自己合成的轉(zhuǎn)鐵蛋白在局部產(chǎn)生轉(zhuǎn)鐵作�,可自身合成�(zhuǎn)鐵蛋白的其他組織和細(xì)胞還包括室管膜、少突膠�(zhì)�(xì)�、轉(zhuǎn)移性黑色素瘤細(xì)胞系以及人乳腺癌�(xì)胞系[1]。轉(zhuǎn)鐵蛋白已在各種體液中檢測�,包括血漿、膽�、羊�、腦脊液、淋巴和母乳。轉(zhuǎn)鐵蛋白的血漿濃度從出生起就�(wěn)�,范圍為2g/L�3g/L,該蛋白的體�(nèi)半衰期為8�。轉(zhuǎn)鐵蛋白水平對(duì)于健康生長非常重�,低�0.1g/L的水平與感染、生長遲緩和貧血的發(fā)病率增加相關(guān)�

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二、轉(zhuǎn)鐵蛋白重要的代謝角色

? ? 鐵是幾種代謝途徑和生理過程的重要元素[1]。鐵�(wěn)�(tài)的維持至�(guān)重要,因?yàn)樽兓�?huì)減少或過量對(duì)人體有害。鐵�(duì)所有生物都很重要。它在DNA�(fù)制中起著核心作用,其中一種關(guān)鍵酶是核糖核苷酸還原�,需要鐵作為輔助因子。鐵還作為血紅素的輔助因子[2]。然而,游離鐵可能有�,通過Fenton和Haber–Weiss反應(yīng)促�(jìn)自由基形成,從而導(dǎo)致組織氧化損�。游離鐵通過將氫過氧化物�(zhuǎn)化為反應(yīng)性過氧基和烷氧基而引起脂�(zhì)過氧化[3]。此�,TF促�(jìn)涉及碳水化合物醛基和蛋白�(zhì)氨基的自氧化反應(yīng),從而形成糖化產(chǎn)物。由于這些原因,鐵以氧化還原非活性形式運(yùn)輸是至關(guān)重要�。因�,TF的主要作用是將鐵安全地運(yùn)�?shù)缴眢w周圍以供�(yīng)生長�(xì)��

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�、轉(zhuǎn)鐵蛋白的作用�(jī)�

? ? �(zhuǎn)鐵蛋白負(fù)�(zé)�(yùn)載由消化管吸收的鐵和由紅�(xì)胞降解釋放的�。以三價(jià)鐵復(fù)合物(TF-Fe3+)的形式�(jìn)入骨髓中,供成熟紅細(xì)胞的生成。轉(zhuǎn)鐵蛋白(TF)結(jié)合鐵是通過與其受體,即Transferrin Receptor 1(TFR1)相互作用而實(shí)�(xiàn)�。TFR1 是一種表�(dá)于細(xì)胞表面的糖蛋�,由兩�(gè)同源二聚體的亞基通過二硫鍵連接而成。在�(xì)胞表�,TF與Fe3+相互作用形成全鐵-TF,并與TFR1受體�(jié)合,在細(xì)胞內(nèi)吞作用下�(jìn)入核�(nèi)�。在偏酸性核�(nèi)體的�(huán)境中,F(xiàn)e3+與TF分離,同�(shí)前列腺蛋�(STEAP)將Fe3+還原為Fe2+,并被二�(jià)金屬離子�(zhuǎn)�(yùn)蛋白1(DMT1)轉(zhuǎn)�(yùn)到細(xì)胞質(zhì)�,然后釋放了Fe3+的TF與TFR1組成TF/TFR1�(fù)合物,通過胞吐作用回游到細(xì)胞表靀在�(xì)胞表�,轉(zhuǎn)鐵蛋白(TF)與受體TFR1分離,成為脫�-TF,然后再與Fe3+重新�(jié)合參與鐵循環(huán)。整�(gè)過程完成后TF和TFR1被循�(huán)利用,�(jìn)入細(xì)胞攝取鐵的下一�(gè)周期中�

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�、轉(zhuǎn)鐵蛋白在�(xì)胞培�(yǎng)中的重要作用

? ? 傳統(tǒng)的細(xì)胞培�(yǎng)基由基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加胎牛或小牛血清組�。血清是一種含有細(xì)胞生長所需生長因子的補(bǔ)充劑。而血清制品的定義不明確的性質(zhì)�(duì)于下游研究和治療�(yīng)用是不可取的,并且存在批次間差異。同�(shí),血清可能含有細(xì)胞生長抑制因子和毒性因�,存在潛在毒�,血清的獲取成本�。血清由于成分不完全明確,給�(xì)胞培�(yǎng)的標(biāo)�(zhǔn)化帶來困�,同�(shí)也給�(xì)胞表�(dá)目的�(chǎn)物純化等下游操作帶來困難。為了克服與血清相�(guān)的不一致性能,無血清培�(yǎng)基是絕對(duì)必要的�

? ? �(xì)胞無血清培�(yǎng)基通常含有多種維生�、氨基酸、無�(jī)�、微量元素、激�、生長因子以及結(jié)合轉(zhuǎn)�(yùn)蛋白等,部分培養(yǎng)基包含動(dòng)物來源或微生物重組表�(dá)的細(xì)胞外基質(zhì)�

? ? �(zhuǎn)鐵蛋白對(duì)于確保足夠的�(xì)胞增殖和功能至關(guān)重要,對(duì)于絕大部分細(xì)胞系在無血清培�(yǎng)基中生長是必需的,為絕大多�(shù)無血清培�(yǎng)基必需添加物組�,通過與轉(zhuǎn)鐵蛋白受�(Transferrin Receptor, TFR) 相互作用,在無血清細(xì)胞培�(yǎng)過程中發(fā)揮重要功�。轉(zhuǎn)鐵蛋白能與三�(jià)鐵離子可逆性結(jié)�,調(diào)節(jié)鐵離子轉(zhuǎn)�(yùn)及代�,維持細(xì)胞內(nèi)的鐵以及鉻、錳、鎘、鎳等多種金屬離子的平衡�(wěn)�(tài)??删S持細(xì)胞的生長和增�,有類似于生長因子的功能。而且,轉(zhuǎn)鐵蛋白也是一種重要的胞外抗氧化劑,可以避免細(xì)胞外�(huán)境中自由基的�(chǎn)�,防止細(xì)胞受到傷��

? ? 總而言�,轉(zhuǎn)鐵蛋白是無血清培�(yǎng)體系中的重要成分,研究表明飽和鐵形態(tài)的轉(zhuǎn)鐵蛋白對(duì)于促�(jìn)�(xì)胞生長是最有效的形�(tài)。對(duì)于雜交瘤,黏連細(xì)胞和懸浮�(xì)胞系,在�(xì)胞培�(yǎng)過程�,應(yīng)保持培養(yǎng)基中�(zhuǎn)鐵蛋白濃度在0.5-100μg/ml。針�(duì)不同的細(xì)胞系,需要選擇最合適的濃��

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�、植物源重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白——禾�(chuàng)TMOsrhTF

禾創(chuàng)TMOsrhTF是一種來源于水稻胚乳�(xì)胞的重組人轉(zhuǎn)鐵蛋�,主要用于細(xì)胞培�(yǎng)。與天然提取來源的轉(zhuǎn)鐵蛋白相比,禾創(chuàng)TMOsrhTF避免了來自于人源或動(dòng)物源病毒及支原體污染的風(fēng)�(xiǎn)��(chǎn)品詳情點(diǎn)擊鏈�

�(guī)格參�(shù)

來源:水稻種�

外觀:粉紅色至紅褐色或橘紅色粉末或晶體粉�

純度:≥95%(RP-HPLC�

pH值:6.0~8.0

�(nèi)毒素:≤1EU/mg

分子量:75kD

鐵飽和度�70%

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主要�(yōu)�

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�(yīng)用案�

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�1:與其他市售rhTF相比,在低血清測試體系下,禾�(chuàng)具有更佳的生物學(xué)活�

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�2:禾�(chuàng)(右)和其他市售rhTF(左)在MSC�(xì)胞無血清培�(yǎng)的細(xì)胞形�(tài)�(duì)�

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�3:與未添加TF相比,禾�(chuàng)能明顯促�(jìn)�(xì)胞增�,并且與其他市售rhTF相比,增殖效果相�(dāng)�

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無血清細(xì)胞培�(yǎng)系列�(chǎn)�

OsrHSA——水稻重組人血清白蛋白

OsrhFN——水稻重組人纖維連接蛋白

OsrhbFGF——水稻重組人堿性成纖維�(xì)胞生長因�

OsrhVEGF——水稻重組人血管內(nèi)皮生長因�

OsrhKGF——水稻重組人角質(zhì)�(xì)胞生長因�

rhIGF-1 LR3——重組人類胰島素生長因子-1 LR3

rhEGF——重組人表皮生長因子

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如您正在�(jìn)行無血清細(xì)胞培�(yǎng)相關(guān)的研究并遇到相關(guān)困擾,歡迎與禾元生物�(lián)��

技�(shù)支持QQ�2490959153

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參考文�(xiàn)

1. Gomme PT, McCann KB, Bertolini J. Transferrin: structure, function and potential therapeutic actions. Drug Discov Today 2005;10:267-273.

2. Li H, Qian ZM. Transferrin/transferrin receptor-mediated drug delivery. Med Res Rev 2002;22:225-250.

3. Rice-Evans C, Green E, Paganga G, Cooper C, Wrigglesworth J. Oxidised low density lipoproteins induce iron release from activated myoglobin. FEBS Lett 1993;326:177-182.

4. Devireddy LR, Myers M, Screven R, Liu Z, Boxer L. A serum-free medium formulation efficiently supports isolation and propagation of canine adipose-derived mesenchymal stem/stromal cells. PLoS One 2019;14:e0210250.

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