以分子生物學為原理,應用遺傳工程和DNA重組技術(shù),利用水稻種子作為生物反應器,在種子中特異性表達各種重組蛋白質(zhì)和小分子多肽。該平臺可解決在其他表達體系表達量低和大規(guī)模生產(chǎn)困難的問題,相比其他原核或真核細胞表達平臺更加安全,成本更低。
外源基因密碼子優(yōu)化
載體構(gòu)建
遺傳轉(zhuǎn)化
組織培養(yǎng)
植株再生
水稻特異性表達與篩選
規(guī)?;N植
選擇具有儲藏功能的水稻胚乳細胞作為生物反應器,采用胚乳細胞特異性表達的啟動子、人工定點突變增強啟動子的轉(zhuǎn)錄水平、蛋白定向儲存、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)減負和密碼子優(yōu)化等綜合技術(shù),使重組蛋白特異性地在水稻胚乳細胞中表達,并定向儲存在蛋白體中,獲得了較高的重組蛋白的表達,使得重組蛋白產(chǎn)量由mg級別提高到20g級別。
水稻表達體系主要雜質(zhì)為四種儲藏蛋白,而且其中主要的三種為非水溶性蛋白,因此重組蛋白的純化工藝簡單,純化成本低。
蛋白原料的生產(chǎn)由發(fā)酵或細胞培養(yǎng)變?yōu)樘镩g種植,不受發(fā)酵體積的技術(shù)限制,且生產(chǎn)規(guī)模的擴大不需要大量固定資產(chǎn)投入用以擴大發(fā)酵罐或細胞培養(yǎng)規(guī)模以及車間建設,而且稻谷原料可在常溫存儲2-3 年,在陰涼條件下儲藏5 年,儲存過程中蛋白質(zhì)不易降解,隨時可以進行規(guī)?;崛『图兓a(chǎn)。
利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的植物源重組蛋白不存在傳播動物血源性病原體的潛在風險。
水稻原料生產(chǎn)能耗非常低,二氧化碳和污水排放為0。